外泌體的分離與鑒定技術(shù)是研究和應(yīng)用的關(guān)鍵步驟,目前常用方法包括超速離心、密度梯度離心、免疫親和捕獲、聚合物沉淀等。其中超速離心法是**經(jīng)典也是使用**廣的方法,能夠較好地富集外泌體,但操作復(fù)雜、時(shí)間長,且容易混雜微囊泡或細(xì)胞碎片。近年來,基于商業(yè)試劑盒的聚合物沉淀法由于操作便捷、效率較高,也***用于臨床樣本的初篩研究。而為了提高純度和特異性,免疫磁珠捕獲法結(jié)合外泌體特異性表面蛋白(如CD63、CD81等)逐漸成為高通量檢測的重要手段。外泌體的鑒定通常需要借助透射電鏡(TEM)、納米顆粒跟蹤分析(NTA)和Westernblot等方法綜合判斷。外泌體檢測服務(wù),醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn),醫(yī)學(xué)模型構(gòu)建。陜西靠譜的外泌體實(shí)驗(yàn)
外泌體在國家自然科學(xué)基金立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是**學(xué) ,近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在**的形成,耐藥性,檢測等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在Molecular Cancer (IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在Journal of Experimental & Clinical Cancer Research(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細(xì)胞外囊泡相關(guān)的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標(biāo)志物的可能性。此外,在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域也有不少外泌體相關(guān)項(xiàng)目中標(biāo)。遼寧細(xì)胞外泌體哪家好外泌體檢測服務(wù),基礎(chǔ)機(jī)制研究好幫手。
外泌體作為一種細(xì)胞來源的“信使”,在疾病診斷和個(gè)體化***中展現(xiàn)出巨大的潛力。由于其內(nèi)容物能夠反映來源細(xì)胞的生理狀態(tài),外泌體常被用作**、***、***類疾病早期篩查的標(biāo)志物。例如,來自腫瘤細(xì)胞的外泌體中常富含與*變相關(guān)的miRNA或突變蛋白,通過液體活檢即可實(shí)現(xiàn)無創(chuàng)檢測。此外,外泌體的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、在體內(nèi)循環(huán)時(shí)間長、易于被細(xì)胞攝取,因此也是藥物遞送和基因***的理想工具。目前已有多項(xiàng)研究嘗試將藥物或RNA分子包裹進(jìn)外泌體,用于靶向***某些難治性疾病,尤其在腫瘤免疫***和神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面前景廣闊。
外泌體的生成,微泡是由質(zhì)膜的出芽形成的,膜雙層通過磷脂的不對稱分布來維持脂質(zhì)的“多面性”。外層富含磷脂酰膽堿和鞘磷脂,而內(nèi)層主要由磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺形成。然而,胞質(zhì)Ca2+的內(nèi)流可以破壞這種不對稱性,導(dǎo)致磷脂跨膜雙層的重新分配,促進(jìn)膜起泡。依賴Ca2+的蛋白水解同時(shí)降解膜相關(guān)的細(xì)胞骨架,促進(jìn)出芽過程。在外泌體形成過程中,首先,MVE(多囊體)向內(nèi)芽形成小泡,內(nèi)含來自細(xì)胞質(zhì)的貨物(蛋白質(zhì)、mRNA和miRNAs)。然后,MVE要么與細(xì)胞膜融合釋放外泌體(內(nèi)囊泡),要么與溶酶體融合降解MVE含量。到達(dá)目的地后,外泌體通過內(nèi)吞途徑或與靶細(xì)胞膜融合,將其內(nèi)容物釋放到細(xì)胞質(zhì)中。細(xì)胞的膜的囊泡也可以直接從細(xì)胞膜上萌發(fā),攜帶活性蛋白、RNA和其他化合物。不容錯(cuò)過的外泌體(Exosome)研究方法,南京英瀚斯生物。
外泌體(exosomes)是一類由細(xì)胞分泌的納米級囊泡,直徑一般在30–150納米之間,***存在于血液、尿液、唾液、腦脊液等多種體液中。外泌體由細(xì)胞內(nèi)的多泡體(MVB)通過與細(xì)胞膜融合后釋放至胞外,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),能夠攜帶蛋白質(zhì)、脂類、mRNA、miRNA及其他非編碼RNA等生物分子。這些內(nèi)含物質(zhì)能夠被鄰近或遠(yuǎn)處的靶細(xì)胞攝取,從而調(diào)節(jié)其生理或病理狀態(tài)。近年來,研究者逐漸認(rèn)識到外泌體在細(xì)胞間通訊、免疫調(diào)節(jié)、**轉(zhuǎn)移、神經(jīng)退行性疾病等多個(gè)領(lǐng)域中扮演著重要角色,并開始將其視為潛在的生物標(biāo)志物和***載體。外泌體關(guān)鍵知識,你必須知道的那些事,南京英瀚斯生物。遼寧細(xì)胞外泌體哪家好
外泌體鑒定透射電鏡,英瀚斯生物。陜西靠譜的外泌體實(shí)驗(yàn)
外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而***靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而***細(xì)胞內(nèi)的信號通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。陜西靠譜的外泌體實(shí)驗(yàn)